Når du utfører en blå hvit skjerm, inneholder hvite bakteriekolonier?
Når du utfører en blå hvit skjerm, inneholder hvite bakteriekolonier?

Video: Når du utfører en blå hvit skjerm, inneholder hvite bakteriekolonier?

Video: Når du utfører en blå hvit skjerm, inneholder hvite bakteriekolonier?
Video: Blue White Screening of Bacterial Colonies - X Gal / IPTG Plates 2024, November
Anonim

Motsatt er hvite kolonier kan ikke metabolisere X-Gal for å produsere blå farge, fordi de ikke produserer funksjonell β-galaktosidase etter å ha tatt opp plasmid som bærer det innsatte DNA og forstyrrer lacZ α-genet. Disse hvite kolonier inneholder rekombinanten bakterie og bør velges (Figur 1).

På denne måten inneholder alle de hvite og blå koloniene et plasmid?

De blå kolonier inneholder "Selv" religiøs plasmider at gjøre ikke ha DNA-innskudd som avbryter lac Z-genet. Hvite kolonier består av bakterier som bærer plasmider som har DNA-innskuddsfragmenter som avbryter lac Z-genet. Valget vil bli gjort på ampicillin inneholder medium.

Hva er hensikten med blåhvit screening på samme måte? De blå – hvit skjermen er en screening teknikk som muliggjør rask og praktisk påvisning av rekombinante bakterier i vektorbaserte molekylære kloningseksperimenter. DNA av interesse ligeres inn i en vektor.

Med tanke på dette, hva er blåhvit koloniscreening?

De blå - hvit skjerm er en screening teknikk som gjør det mulig å påvise vellykkede ligeringer i vektorbasert genkloning. DNA av interesse ligeres inn i en vektor. Hvis ligeringen var vellykket, bakterien koloni vil være hvit ; hvis ikke, koloni vil være blå.

Hvorfor er noen kolonier blå og andre hvite?

Noen koloni som inneholder plasmidet (og derfor det fungerende β-galaktosidase-genet) vil snu blå , et resultat av β-galaktosidaseaktiviteten. Dette kalles α-komplementering. Innsatsen forstyrret β-galaktosidase-genet, og derfor disse kolonier forbli hvit.

Anbefalt: