Hvordan fungerer Sanger DNA-sekvensering?
Hvordan fungerer Sanger DNA-sekvensering?

Video: Hvordan fungerer Sanger DNA-sekvensering?

Video: Hvordan fungerer Sanger DNA-sekvensering?
Video: DNA Sequencing - 3D 2024, November
Anonim

Sanger-sekvensering resulterer i dannelsen av forlengelsesprodukter av forskjellige lengder som avsluttes med dideoksynukleotider i 3'-enden. Forlengelsesproduktene separeres deretter ved kapillærelektroforese eller CE. Molekylene injiseres med en elektrisk strøm i et langt glass kapillær fylt med en gelpolymer.

På denne måten, hva er Sanger -metoden for DNA -sekvensering?

Sanger-sekvensering , også kjent som kjedeavslutningen metode , er en teknikk for DNA-sekvensering basert på selektiv inkorporering av kjedeterminerende dideoksynukleotider (ddNTP) av DNA polymerase under in vitro DNA replikering. Den ble utviklet av Frederick Sanger og kolleger i 1977.

Dessuten, hvordan fungerer sekvensering av kjedeavslutning? Sanger DNA sekvensering er også kjent som kjede - avslutning Metode av sekvensering . ddNTP-er resulterer i avslutning av DNA-tråden fordi ddNTP-er mangler 3'-OH-gruppen som kreves for fosfodiesterbindingsdannelse mellom nukleotider. Uten dette båndet vil kjede av nukleotider som dannes er avsluttet.

Ganske enkelt, hvorfor gjør vi Sanger-sekvensering?

Sanger-sekvensering er en metode av DNA-sekvensering basert på selektiv inkorporering av kjedeterminerende dideoksynukleotider av DNA polymerase under in vitro DNA replikering. Den har fortsatt fordelen fremfor kortlest sekvensering teknologier (som Illumina) som det kan produsere DNA -sekvens leser på > 500 nukleotider.

Er Sanger-sekvensering nøyaktig?

Sanger-sekvensering med 99,99 % nøyaktighet er "gullstandarden" for klinisk forskning sekvensering . Nyere NGS-teknologier blir imidlertid også vanlig i kliniske forskningslaboratorier på grunn av deres høyere gjennomstrømningsevne og lavere kostnader per prøve.

Anbefalt: